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AFM在生物质膜中的应用

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ilabilab|  楼主 | 2017-11-1 15:29 | 只看该作者 回帖奖励 |倒序浏览 |阅读模式
AFM以其独特的优势(纳米级的空间分辨率、皮牛级力灵敏度、免标记、可在溶液环境下工作)被广泛应用于生物研究。AFM不仅可以在近生理环境下对生物被膜表面超微形貌进行可视化表征,还可以通过纳米压痕对生物被膜的机械特性(弹性和粘性)进行定量测量,利用AFM单细胞和单分子力谱技术可以获得生物被膜形成过程中细胞-细胞和细胞-基底之间的相互作用力,为生物被膜的实时原位系统研究提供了可行性。

AFM在生物质膜中的应用
对于细菌样品,目前最常用的AFM模式是轻敲模式,特别是生物被膜成像、膜表面大分子高分辨率原位成像,轻敲模式横向剪切力小且有助于获得高分辨率图像。


图1:不同时间尺度下S.mutans初期生物被膜的AFM成像((弹性系:40N/m,共振频率:300kHz,曲率半径:8nm)

由于大部分情况下仅从AFM图像难以辨识出细胞精细结构,因此大多需要借助特定化学或生物分子修饰的AFM探针,利用生物大分子之间特异性的抗原-抗体作用对细胞表面特定生物分子的分布、结构和机械特性进行研究。


图2:活细胞表面的分子识别位点成像


利用AFM可研究养分对生物被膜形成的影响,纳米压痕(AD-150-NM,弹性系数:150N/m,共振频率:500kHz,曲率半径:<15nm)的结果显示,探针和生物被膜表面的粘性随培养时间的延长而逐渐增加,表明随着生物被膜的成熟,细胞开始释放胞外聚合物并在生物被膜表面积累。

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